貨號(hào)：QR1016                 規(guī)格：5 次/ 10次

保存：常溫保存，復(fù)檢期1年。(注:RNaseA以附件形式發(fā)貨，收到未使用前請(qǐng)-20℃保存)

試劑盒內(nèi)容：

產(chǎn)品說(shuō)明：

本試劑盒采用異丙醇沉淀法提取質(zhì)粒DNA，簡(jiǎn)單易行，只需要常規(guī)離心機(jī)和幾種簡(jiǎn)單的試劑，操作步驟較少。使用本試劑盒提取的質(zhì)粒DNA可適用于各種常規(guī)操作，包括酶切、PCR、測(cè)序、連接和轉(zhuǎn)化等實(shí)驗(yàn)。

如非指明，所有離心步驟均為使用臺(tái)式離心機(jī)在室溫下離心。

操作步驟（僅供參考）：

1、取100-500 mL細(xì)菌培養(yǎng)物轉(zhuǎn)入500 mL離心管中，4000 rpm離心10 min，盡量吸除上清。

2、向留有菌體沉淀的離心管中加入 10 mL 溶液Ⅰ，使用旋渦振蕩器或其他方法徹底懸浮細(xì)菌細(xì)胞沉淀，懸浮沉淀需均勻，不應(yīng)留有小的菌塊。注意:如果菌塊未徹底混勻，會(huì)影響裂解導(dǎo)致質(zhì)粒提取量和純度偏低。

3、向離心管中加入10 mL溶液Ⅱ，溫和地上下翻轉(zhuǎn)6-8次使菌體充分裂解。注意:混勻一定要溫和以免污染細(xì)菌基因組DNA，此時(shí)菌液應(yīng)變得清亮粘稠，作用時(shí)間不要超過(guò)5 min，以免質(zhì)粒受到破壞。

4、向離心管中加入15 mL溶液Ⅲ，立即溫和地上下翻轉(zhuǎn)6-8次，充分混勻，此時(shí)會(huì)出現(xiàn)白色絮沉淀。

5、將上述液體在 -20 ℃放置30 min，4000 rpm離心20 min。

6、分別吸取上清液至新的離心管中，按1：100比例加入Rnase A，37 ℃孵育 39 min。

7、向離心管中加入等體積的異丙醇， -20 ℃沉淀60 min，4000 rpm離心20 min，棄上清。

8、加入70 ％乙醇1 mL洗滌，4000 rpm 離心10 min，棄廢液。

9、室溫烘干質(zhì)粒，加入1 mL經(jīng)65℃水浴加熱的洗脫液 TE，室溫放置2 min，溶解質(zhì)粒。

10、電泳檢測(cè)質(zhì)粒純度，或者紫外分光光度計(jì)檢測(cè)濃度。