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產(chǎn)品編號:QR1001
產(chǎn)品價格:¥ 詢價
產(chǎn)品簡介:HiFi DNA Polymerase,HiFi DNA Polymerase,HiFi DNA Polymerase,HiFi DNA Polymerase
制品內(nèi)容
Qizyme HiFi DNA Polymerase (2 U / μl) 50 μl (500ul)
5× Qizyme HiFi Reaction Buffer 1 ml (10ml)
dNTP Mixture(10 mM) 100 μl (1000ul)
產(chǎn)品簡介
Qizyme HiFi DNA Polymerase是一種超保真DNA聚合酶, 該酶具有優(yōu)越的可靠性和高特異性, 適合擴增長鏈DNA,并且顯著地減少PCR延伸時間。通過改良提高了持續(xù)合成能力和PCR擴增速率,結(jié)合該酶的3’-5’核酸外切酶活性使得其保真性是普通Taq酶的50倍。而該酶的獨特結(jié)構使其即便在有PCR抑制劑存在的情況下,也能快速有效的得到目的產(chǎn)物。該酶PCR擴增產(chǎn)物為平末端。
貯存溶液
20 mM Tris-HCl(pH7.4 @ 25°C),100 mM KCl,1 mM DTT,0.1 mM EDTA,穩(wěn)定劑,50% 甘油。
保存: -20 °C
優(yōu)勢
1)保真度高:確保PCR復制的精確程度
2)快速:延伸時間短(15-30秒/ kb)
3)方便:功能強勁,只需最少的優(yōu)化
4)高產(chǎn)量:用更少的酶,獲得更高的產(chǎn)量
用途
1)高保真PCR
2)快速菌落PCR
3)高通量PCR
4)克隆
PCR產(chǎn)物
使用Qizyme HiFi DNA Polymerase擴增的產(chǎn)物為平末端,如果產(chǎn)物用于克隆,建議使用平末端連接。如果需
要進行T / A克隆, 在加A之前需要純化DNA, 引入Qizyme HiFi DNA Polymerase會降解產(chǎn)生的突出端。
反應條件
50 μl反應體系中含有:1× Reaction Buffer,DNA模板,0.2 μM上游引物,0.2 μM下游引物,0.2 mM dNTP,1 U Qizyme HiFi DNA Polymerase。
單位定義
一個單位 Qizyme HiFi DNA聚合酶可在 74 °C,在 30 分鐘內(nèi)向不溶于酸材料中摻入 10 nmol脫氧核糖核苷酸。
PCR反應液組成 (Total 50 μl)
組分 |
使用量 |
終濃度 |
Qizyme HiFi DNA Polymerase |
0.5 μl |
1.0 U / 50 μl |
Primer1(10 μM) |
1 μl |
0.2 μM |
Primer2(10 μM) |
1 μl |
0.2 μM |
DNA |
<250 ng |
<250 ng |
dNTPs (10mM) |
1 μl |
200 μM |
5× Qizyme HiFi Reaction Buffer |
10 μl |
1 × |
ddH2O |
Up to 50 μl |
|
注意:PCR反應建立后,將反應物上下顛倒混勻,短暫離心將液體收集到管底。如果使用的PCR循環(huán)儀沒有加熱蓋,可在樣品上覆蓋礦物油。PCR反應條件 (舉例)
循環(huán)步驟 |
溫度 |
時間 |
預變性 |
98 °C |
30 s |
25-35 Cycles |
98 °C |
10 s |
終延伸 |
72 °C |
5-10 min |
保存 |
4-10 °C |